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 　　EIA/ELISA技術(shù)在60年代提出，因為具有靈敏度高、特異性強(qiáng)，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作方法簡便快速、無放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點，迅速在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論研究，臨床病毒學(xué)和生物化學(xué)檢驗等工作中獲得了廣泛的應(yīng)用。這篇文章中Lequin博士追述了EIA和ELISA技術(shù)的發(fā)展歷程。

　　當(dāng)初我們在Oranon開展這個項目的初衷只是由于當(dāng)時Oranon管理部門熱衷于 多年前 免疫化學(xué)診斷妊娠的成功（以血清抑制凝集試驗和乳膠凝集試驗 為基礎(chǔ)）。但是由于工程太大 ，需耗時較多而阻止了該項技術(shù)的的深入發(fā)展。Schuurs提出將酶附著于抗原或者抗體，通過化學(xué)反應(yīng)的測定終產(chǎn)物顏色這一設(shè)想時，大家都表示了贊同。因為以 一種 簡易的可以根據(jù)顏色變化而即插即讀的試紙條作為基礎(chǔ)，似乎可以取得進(jìn)一步的成功。我們采用了分析妊娠HCG來作為我們研究的模型。盡管如此，Schuurs對于這項技術(shù)將來的應(yīng)用仍然非常清楚。正象他在試驗建議的zui后一句話所說的那樣：我認(rèn)為，探索這項技術(shù)所取得的任何成功，都將開辟免疫學(xué)診斷的新領(lǐng)域。

　　早期的研究過程中我們至少在試驗原理上還是取得了一定的進(jìn)展，但是盡管我們盡zui大努力去發(fā)展以EIA技術(shù)為基礎(chǔ)的根據(jù)顏色變化而診斷妊娠的即插即讀的技術(shù)時，還是失敗了。將許多必需的試劑壓縮到一個試紙條上，并且在模板上使反應(yīng)過程標(biāo)準(zhǔn)化，在那個時間看起來還需要解決很多技術(shù)問題。實際上，在Oranon研究組發(fā)現(xiàn)了溶膠顆粒免疫測定（SPIA）技術(shù)發(fā)明后，依靠顏色變化診斷妊娠的問題也就變得可行了?？偨Y(jié)以前的研究經(jīng)驗，我們改變了原來的研究方向。如內(nèi)分泌領(lǐng)域（我們的目的是直接想同RIA競爭），感染病領(lǐng)域。zui初是檢測乙型肝炎檢測，該領(lǐng)域在前些年澳抗被作為乙型肝炎病毒感染的標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)后就進(jìn)行了一些探索。

　　同時，我們也借鑒學(xué)習(xí)了Engvall和Perlmann以及隨后的學(xué)者開展的關(guān)于ELISA和EIA的研究，而我們主要的研究領(lǐng)域是細(xì)菌、寄生蟲和病毒，尤其是London的Voller、Bidwell以及荷蘭國家公共衛(wèi)生研究所的Ruitenberg所做的工作。當(dāng)時領(lǐng)域內(nèi)所使用的方法如免疫熒光，血清凝集實驗，補體結(jié)合實驗比較的笨拙，相比較而言ELISA和EIA法的簡易性決定了它將來在廣泛的微生物感染診斷中能夠獲得快速的發(fā)展。能夠迅速為大家所接受，促進(jìn)了眾多的生物醫(yī)學(xué)實驗室和第三世界的國家建立了一種可靠的感染性疾病診斷方法。

　　當(dāng)時，這種方法只被局限地應(yīng)用于少數(shù)高度專業(yè)的實驗室。Voller和Bidwell首先應(yīng)用了96孔微板用于EIA/ELISA實驗，也就是現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的ELISA試劑盒的雛形，由此也引發(fā)了*次免疫分析自動化的浪潮。我們在Oranon也使用了這種方法檢測乙型肝炎和其他獻(xiàn)血篩查項目。

　　RIA法及早進(jìn)入內(nèi)分泌學(xué)和腫瘤學(xué)方面的應(yīng)用領(lǐng)域并且趨于成熟，它的性和靈敏度也超過了興起不久的EIA和ELISA技術(shù)，而且很多實驗室都已經(jīng)配備了放射性核素的相關(guān)設(shè)備，并且習(xí)慣了與之開展工作，他們還不能意識到非同位素檢測的優(yōu)勢。是自動化改變了這些，RIA的自動化牽涉到放射性同位素引起的容器和廢物處理問題，而EIA和ELISA卻使全自動隨機(jī)存取的免疫分析系統(tǒng)成為可能，該系統(tǒng)正是80年代診斷儀器制造商努力開拓的方向。這就導(dǎo)致了許多低成本的、設(shè)備簡單，可靠性強(qiáng)的免疫化學(xué)診斷方法從專業(yè)的放射性實驗室進(jìn)入了普通化學(xué)實驗室。EIA和ELISA也因此找到了他在診斷感染性疾病以外的應(yīng)用領(lǐng)域。

Oranon管理部門處理所采用的策略，也是EIA和ELISA技術(shù)取得成功的決定性因素。70年代中期，眾多公司匯集于Oranon，都希望得到當(dāng)局的許可。管理層在經(jīng)過長時間的討論后，決定不壟斷該技術(shù)，而是將該技術(shù)轉(zhuǎn)讓給任何達(dá)到了許可條件的公司，因為該技術(shù)在實驗室診斷醫(yī)學(xué)中已經(jīng)廣泛應(yīng)用，并且不斷擴(kuò)展，后來總共一百多張許可證的數(shù)據(jù)來說明當(dāng)時的情況是十分貼切的。我相信這項措施對實驗室診斷醫(yī)學(xué)是有所幫助的，有時候也會設(shè)想，當(dāng)其他公司為zui近一項重要的技術(shù)而采用了一種相同的許可政策時，在將來會獲得怎樣的進(jìn)展，產(chǎn)生怎樣的影響。

　　回顧過去，我仍然對我們當(dāng)初嘗試一種妊娠診斷方法都帶來了結(jié)果感到吃驚！